lunes, 15 de octubre de 2018

Hola Chicos, le pongo la metodología para la practica de catalasa, en realidad son 2, en una la variable independiente es la concentración de sustrato y en la otra se emplean diferentes pesos (cantidades) del tejido que es donde está la enzima catalsa, por lo que su independiente es la cantidad de catalasa. Miss Paty les indicará con cual van a trabajar.

Metodología 1.-
En este caso la var. Independiente es la concentración del Peróxido de hidrógeno (sustrato) y se van a medir 3 variables dependientes, a) el tiempo que dura la reacción. b) el cambio en la temperatura (es una reacción exotérmica) y c) el volumen de Oxigeno que se desprende de la reacción (volumen de espuma)

  1. Preparar las disoluciones poniendo las cantidades de peróxido de hidrogeno que se indican en la tabla y aforando cada una con agua hasta completar 100ml para lograr las concentraciones que se muestran en la última columna de la tabla:                                                                                                                                             
    Disoluciones
    Cantidad de H202 ml. 
    Concentración
    % v/v
    0
    0
    20
    20
    40
    40
    60
    60
    80
    80
    100
    100
                                                                                                                        
  2. Marcar con maskin y un plumón cada vaso de precipitado donde se vacian las disoluciones con su concentración 0%, 20%, 40%, 60%, 80% y 100% respectivamente.                                                                                                                                                                                                  
  3. Licuar los 200 gr de hígado con 30 ml. de agua.                                                                                                                                                                                                                                      
  4. Marcar con maskin y un plumón cada vaso de precipitado donde se vacian las disoluciones con su concentración 0%, 20%, 40%, 60%, 80% y 100% respectivamente.                                                                                                                          
  5. En  la balanza  primero colocar el vidrio de reloj donde se colocara el hígado para pesarlo y tarar.                                                                                                                                                     
  6. Sobre el vidrio de reloj ir agregando la pasta de hígado hasta obtener un peso de 3 gr. de hígado, hacerlo cuidadosamente utilizando una  cuchara.                                                                                                                                                                                                                       
  7. Vaciar los 3 gr. de hígado utilizando la cuchara en una probeta de 250 ml, cuidando de que caiga al fondo sin tocar las paredes de la probeta.                                                                                               
  8. Medir 10 ml. de la concentración a utilizar utilizando la probeta de 10 ml.                                                                                
  9. Tomar la temperatura inicial de la disolución con el termómetro.                                                                                                                                                                                                           
  10. En la probeta de 250 ml. con el hígado vaciar los 10 ml. de la disolución.                                                                                                                                                                                             
  11. Iniciar el conteo del tiempo con un cronómetro.                                                                                                                                                                                                                     
  12. Esperar a que la espuma que se forma con el Oxígeno desprendido de la reacción llegue al nivel máximo, y parar el cronometro para medir el tiempo que tardó en llegar al nivel máximo la espuma.                                                                                                                                                                                                                                                                           
  13. Medir la temperatura final después de la reacción                                                                                                                                                                                                                              
  14. Medir el volumen de la espuma causada por la reacción. Recordar que se tiene que contar desde donde empieza la espuma hasta donde llega, no desde donde está el agua,  esto es IMPORTANTE. Si no se observa formación de espuma anotar 0 ml.                                                                                                                                                                                          
  15. Seguir el mismo procedimiento con todas las concentraciones (0%, 20%, 40%, 60%, 80% y 100%) empezando con la más chica (0%).                                                                                                                                                                                                                                         
  16. Cada equipo hará una repetición de cada concentración, de manera que al final se tendrán 6 repeticiones por cada concentración.
Vaciar los restos en un lavabo y usar una red para que los restos de hígado caigan en el mismo.. Vaciar los restos de hígado en una bolsa de plástico, y luego a la basura orgánica y que se pueda emplear para preparar una composta.


Metodología 2:
En este caso la var. Independiente es la cantidad de higado  (enzima) de la que van  a emplear 6 pesos diferentes de tejido que son: 0 g, 0.5 g, 1.0 g, 2.0 g, 2.5 g y 3.0 g. y se van a medir las mismas variables dependientes que en el caso anterior, a) el tiempo que dura la reacción. b) el cambio en la temperatura (es una reacción exotermica) y c) el volumen de Oxigeno que se desprende de la reacción (volumen de espuma).

  1. Licuar los 200 gr de hígado con 30 ml. de agua.                                                                                  
  2. Utilizar la balanza y primero colocar el vidrio de reloj donde se colocara el hígado para pesarlo y tarar.                                                                                                                                                                                                                                                                                                        
  3. Sobre el vidrio de reloj ir agregando la pasta de hígado hasta obtener la cantidad. de hígado que se necesite en cada ocasión, hacerlo cuidadosamente utilizando una  cuchara.                                                                                                                                                                                      
  4. Vaciar la cantidad correspondiente de hígado utilizando la cuchara en una probeta de 250 ml. Cuidando de que caiga al fondo sin tocar las paredes de la probeta.                                                  
  5. Medir 10 ml. Del peróxido de hidrógeno utilizando la probeta de 10 ml.                                                                                                                                                                                                
  6.  Tomar la temperatura inicial del peróxido con el termómetro.                                                                   
  7. En la probeta de 250 ml. con el hígado vaciar los 10 ml. de la disolución.                                         
  8. Iniciar el conteo del tiempo con un cronómetro.                                                                                                                                                                                                                                
  9. Esperar a que la espuma que se forma con el Oxígeno desprendido de la reacción llegue al nivel máximo y en ese momento parar el cronometro para medir el tiempo que tardó en llegar a ese nivel.                                                                                                                                                                                                                                                                               
  10. Medir la temperatura final después de la reacción.                                                                                 
  11. Medir el volumen de la espuma causada por la reacción. Recordar que se tiene que contar desde donde empieza la espuma hasta donde llega, no desde donde está el agua. esto es IMPORTANTE. Si no se observa formación de espuma anotar 0 ml.                                                                                                                                                                                              
  12. Seguir el mismo procedimiento con todos los pesos indicados.                                                                                                                                                                                                             
  13. Cada equipo hará una repetición con cada uno de los pésos, de manera que al final se tendrán 6 repeticiones por cada peso.
Vaciar los restos en un lavabo y usar una red para que los restos de hígado caigan en el mismo.. Vaciar los restos de hígado en una bolsa de plástico, y luego a la basura orgánica y que se pueda emplear para preparar una composta..





Reacción de la catalasa del higado con el peróxido de 

hidrógeno, desprende Oxigeno molecular que se 
observa como espuma y como es una reacción exotérmica desprende energía que provoca que la temperatura se eleve.

Les recuerdo los puntos que debe cubrir su reporte, como espero que hayan tomado nota de lo que se dijo y discutió en el laboratorio, aquí solo resalto de una manera muy general lo que se espera que contenga su reporte.

  • Portada (Diploma) que incluya un titulo descriptivo, o sea que permita saber puntualmente de que se trata su proyecto.
  • Pregunta de investigación que comprenda todos los elementos que ya hemos comentado, solo recuerden que tienen que mencionar las 3 variables dependientes con las que estimarán la actividad de la enzima, la variable independiente con que hayan trabajado (incluyendo sus variaciones) el nombre de la enzima y el tejido que emplean como fuente de enzima.
  • Marco teórico redactado por ustedes, en el que se exponga claramente el contexto de su pregunta de investigación, es decir, debe explicar lo que se sabe actualmente (en la bibliografía) al respecto de lo que plantean en su pregunta de investigación. es decir como se ve afectada la actividad de una enzima cuando se incrementa la concentración del sustrato o de la misma enzima, que es la catalasa y cual es la reacción que cataliza y cuales sus productos, deben también explicar que es una reacción exotérmica.
  •  Identificación clara y precisa de todas sus variables.
  • Hipótesis (pueden poner 3, una para cada variable dependiente, si es que se les dificulta plantearla como una sola).  Pueden ayudarse con gráficas que permitan visualizar lo que esperan obtener, 
  • Forma de controlar las variables independiente y las que mantienen constantes, lo cual pueden hacer en una tabla o texto antes de la metodología o incluirlo dentro de la explicación de la metodología 
  • Lista de materiales
  • Metodología detallada y explicada (se trata de exponer el razonamiento detrás del diseño de la metodología, debe ser claro que la entienden y manejan eficazmente). No se vale copiar textualmente la que les puse, cambien la redacción y agreguen información en base a su experiencia al hacer el experimento. 
  • consideraciones éticas, ambientales y/o de seguridad.
  • Tablas de datos brutos (las de su equipo y luego las de todo el salón) y procesados, como ya lo saben hacer, recuerden poner títulos descriptivos a las tablas, poner los encabezados de columnas y filas,  las unidades y el margen de incertidumbre y mantener el mismo numero de decimales. Recuerden que los valores de la variable independiente van en la primera columna.
  • Agreguen datos cualitativos asociados debajo de la tabla de datos brutos
  • Procesen sus datos como ya saben, calculando la diferencia entre valor inicial y final cuando corresponde, calcular media y desviación estándar.
  • Gráficas con titulo, nombre de las variables en ambos ejes, unidades y margen de incertidumbre.
  • Interpretación de sus datos procesados ÚNICAMENTE después de las gráficas.
  • Discutan y concluyan dando respuesta a la pregunta de investigación en base a los resultados que obtuvieron, analicen sus datos y compárenlos con la hipótesis y con reportes en bibliografía.
  • No olviden comentar la confiabilidad de sus datos en base a su dispersión y coeficiente de determinación (R2). 
  • Analicen las fuentes de error, recuerden no se trata solo de mencionarlas sino de explicar como pudieron afectar sus resultados.
  • Para cada fuente de error proponer una mejora realista y bien fundamentada.
  • Prpuesta de ampliación de la investigación.
  • Bibliografía.
  • Tengan en cuenta que la bibliografía debe estar citada correctamente en su reporte, que también se evalúa la claridad con que redactan y desarrollan las ideas, siempre teniendo como eje central la pregunta de investigación. Se espera que a lo largo de todo su reporte sea posible seguir el desarrollo de un razonamiento lógico claramente expuesto. Tengan también en cuenta que la forma en que presentan todos los elementos, incluyendo las tablas, gráficas, esquemas y fotografías (cuando competa) se incluye como una forma de comunicación y por tanto se evalúa.
Espero que esto les ayude y resuelva sus dudas con respecto a lo que debe contener el reporte.

Saludos a todos.